細胞復蘇，生物學的一種術語，是指將凍存在液氮或者-70℃冰箱中的細胞解凍之后重新培養(yǎng)，細胞恢復生長的過程。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。

　　細胞復蘇的步驟：

　?、賹⒗鋬龉軓囊旱腥〕觯杆偻度?7℃水浴融化，細胞融化后要盡快(約1min)移出37℃水浴。37℃水浴時間延長會提高細胞死亡率，復蘇過程中一般細胞死亡率在20%～25%之間。

　　②迅速用酒精棉球擦拭冷凍管外部殺菌消毒，然后放置在冰浴上。

　?、坌⌒拈_啟瓶蓋，把細胞轉入含有4mL培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，然后把培養(yǎng)瓶移至培養(yǎng)箱，26℃～28℃培養(yǎng)1h，讓細胞貼壁。

　?、芗毎N壁后，小心移棄培養(yǎng)基，主要是去掉DMSO(懸浮生長細胞要通過離心沉淀除去DMSO)、死細胞及其碎片，加5mL新鮮培養(yǎng)基，26℃～28℃培養(yǎng)。

　?、菁毎囵B(yǎng)24h后，更換新鮮培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)直到形成單層，便可以傳代。

　?、拊敿氂涗洀吞K細胞的名稱、數(shù)量、復蘇時間、存放部位等。

　　細胞復蘇的注意事項：

　　1、注意無菌操作。

　　2、應在1-2min內使凍存液融化。如果復溫速度太慢，則會造成細胞損傷。另外，細胞復蘇后的操作-好在4℃冰浴中進行，以減少冷凍保護劑對細胞的毒性。

　　3、細胞復蘇過程中，升溫的速率要大，把從液氮或-70℃冰箱中取出的細胞在短的時間內放入水浴鍋。

　　4、細胞放入水浴中注意用鑷子夾住細胞凍存管并在水浴中不時晃動，使其受熱均勻，并防止水浴時水進入細胞凍存管污染細胞。打開細胞凍存管之前要用酒精棉球將凍存管消毒并晾干。

　　5、液氮操作有一定的危險性，打開液氮罐取出細胞時，戴上防護眼鏡。

　　6、如果凍存管密封不嚴，液氮可被吸入。由于解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，將可能發(fā)生爆炸。復蘇過程中應蓋上恒溫水浴鍋的蓋。